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http://ri.ufrb.edu.br/jspui/handle/123456789/3209
metadata.dc.type: | Trabalho de Conclusão de Curso |
metadata.dc.degree.level: | Bacharelado |
Título : | Potencial biotecnológico de fungos filamentosos celulolíticos isolados de restinga |
metadata.dc.creator: | Santos, Josenilda Carlos dos |
metadata.dc.contributor.advisor1: | Nascimento, Rodrigo P. do |
metadata.dc.contributor.advisor-co1: | Marbach, Phellippe A. S. |
metadata.dc.contributor.referee1: | Cazetta, Marcia Luciana |
metadata.dc.contributor.referee2: | Bispo, Aline Simões da Rocha |
metadata.dc.description.resumo: | Os objetivos deste trabalho foram isolar quantificar, identificar e avaliar a capacidade celulolítica dos fungos filamentosos celulolíticos isolados de sedimento arenoso sob formação arbustiva fechada na restinga de Guaibim, no município de Valença-BA. Foram realizadas quatro coletas mensais de sedimento, destas coletas foram obtidas duas amostras, de pontos diferentes. Para o isolamento foi adotada a Técnica das Diluições Seriadas e o inoculo das diluições foi transferido para placas com meio seletivo de sais minerais com 1% (p/v) de celulose microcristalina. As placas foram incubadas a 28oC por 10 dias. Para identificação morfológica em nível de gênero foi realizada a técnica de microcultivo. Os isolados foram testados quanto ao potencial celulolítico em fermentação submersa contendo papel filtro como única fonte de carbono e meio de sais minerais, para posterior detecção de atividade de Celulase Total (FPase) e Endoglucanase (CMCase), por meio da quantificação de açúcares redutores. O isolado promissor foi testado quanto à produção de celulases utilizando bagaço de cana in natura como fonte de carbono e milhocina como fonte de nitrogênio, de acordo com a matriz do planejamento fatorial DCCR 23. A produção da enzima foi otimizada e validada de acordo com as análises fornecidas pelo programa STATSOFT 7.0® e o extrato enzimático foi caracterizado quanto ao ótimo de temperatura e pH. Foram isolados 50 fungos filamentosos celuloliticos da formação arbustiva fechada da restinga de Guaibim. A maioria dos fungos identificados pertence ao filo Ascomycota, sendo os gêneros Penicillium, Aspergillus e Trichoderma os mais frequentes. Cerca de 44% dos isolados testados apresentaram atividade enzimática de FPase maior que 100 U.L-1 e 32% apresentaram atividade de CMCase maior que 500 U.L-1. O isolado mais promissor foi o Aspergillus sp. IS-17 que produziu 880 U.L-1 de atividade de FPase e 5016 U.L-1 de atividade de CMCase em fermentação submersa contendo papel filtro como única fonte de carbono, sendo, por isso, selecionado para fermentação utilizando bagaço de cana in natura. O isolado testado produziu bons níveis de atividade enzimática, atingindo 3518 U.L-1 após três dias de fermentação sob condições otimizadas de produção enzimática. A caracterização bioquímica revelou que a enzima endoglucanase produzida por Aspergillus sp. IS-17 possui ótimo de atividade à 70oC, pH 6,0 utilizando como tampão citrato de sódio. Os fungos isolados da restinga de Guaibim apresentaram elevado potencial biotecnológico e poderão ser utilizados em diferentes processos industriais, porém, novos estudos deverão ser conduzidos no intuito de detalhar a ação da enzima, verificar a viabilidade econômica e a composição do resíduo utilizado. |
Palabras clave : | Aspergillus Sedimento arenoso Guaibim (BA) Celulase Bagaço de cana |
Resumen : | The objectives of this study were to isolate, quantify, identify and assess the cellulolytic ability of cellulolytic fungi of sandy sediment in the thicket of Guaibim sandbank in the town of Valença, Bahia. Were collected monthly sediment, in a total of four collections, these collections were obtained two samples of different points. To isolate was taken to the serial dilution technique and the inoculum was transferred to dilution plates with selective medium mineral salts 1% (w/v) microcrystalline cellulose. The plates were incubated at 28°C for 10 days. For morphological identification at genus level was performed microculture technique. The isolates were tested for potential cellulolytic submerged in filter paper containing as the sole carbon source and mineral salts medium for subsequent detection of whole cellulase activity (FPase) and Endoglicanase (CMCase), by quantification of reducing sugars. The isolated promising was tested for production of cellulase using sugar cane bagasse in natura as the carbon source and corn steep as nitrogen source such, according to the factorial design CCRD 23 array. The enzyme production was optimized and validated according to the analyzes provided by the program STATSOFT ® 7.0 and the enzyme extract was characterized as the optimal temperature and pH. 50 cellulolytic fungi were isolated from the thicket of Guaibim sandbank. Most identified fungi belong to the phylum Ascomycota, and the genus Penicillium, Aspergillus and Trichoderma, more frequent. About 44% of the isolates tested showed enzyme activity FPase greater than 100 U.L-1 and 32% showed CMCase activity greater than 500 U.L-1. The most promising isolate was Aspergillus sp. IS-17 which produced 880 U.L-1 FPase activity and 5016 U.L-1 CMCase activity in submerged fermentation containing filter paper as the sole carbon source, and therefore selected for fermentation using sugar cane bagasse in natura. The isolate tested produced satisfactory levels of enzymatic activity, reaching 3518 U.L-1 after three days of fermentation under optimized conditions of enzyme production. Biochemical characterization revealed that the endoglucanase enzyme produced by Aspergillus sp. IS-17 has optimum activity at 70 ° C, pH 6.0 using sodium citrate as buffer. The isolates of the thicket of Guaibim showed a high biotechnological potential and may be used in various industrial processes, however, new studies should be conducted in order to detail the action of the enzyme, determine the economic viability and composition of waste used. |
metadata.dc.subject.en: | Aspergillus Sandy sediment Guaibim (BA) Cellulase Sugar cane bagasse |
Editorial : | Universidade Federal do Recôncavo da Bahia |
metadata.dc.publisher.department: | CCAAB - Centro de Ciências Agrárias, Ambientais e Biológicas |
Fecha de publicación : | 3-mar-2012 |
metadata.dc.subject.cnpq: | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS |
metadata.dc.rights: | Acesso Aberto |
metadata.dc.date.available: | 2024-07-17T21:33:38Z |
URI : | http://ri.ufrb.edu.br/jspui/handle/123456789/3209 |
Aparece en las colecciones: | CCAAB - Bacharelado em Biologia - TCC |
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